空白琼脂通常用于微生物学实验中,用于观察微生物在琼脂培养基上的生长情况。以下是如何配制2%空白琼脂的步骤:
材料和工具
琼脂粉(Agar)
蒸馏水或去离子水
烧杯或锥形瓶
烧瓶
电子秤
灭菌锅或高压灭菌器
灭菌器或酒精灯
移液器或量筒
配制步骤
1. 称量琼脂:根据所需琼脂的量,用电子秤称取适量的琼脂粉。通常,2%的琼脂意味着每100毫升培养基中含有2克琼脂。
2. 溶解琼脂:将称取的琼脂粉放入烧杯或锥形瓶中,加入约80-90毫升的蒸馏水或去离子水。用玻璃棒搅拌直至琼脂完全溶解。
3. 加热:将烧杯或锥形瓶放入水浴中加热,不断搅拌,直到琼脂完全溶解。注意不要让琼脂沸腾,以免水分蒸发过多。
4. 定容:将溶解好的琼脂溶液转移到烧瓶中,用蒸馏水或去离子水将总量定容至所需体积(例如,100毫升)。
5. 灭菌:将定容后的琼脂溶液放入高压灭菌器中,按照高压灭菌器的操作规程进行灭菌。通常,灭菌压力为15磅(约1.05kg/cm2),温度为121°C,时间为15-20分钟。
6. 冷却:灭菌后,将琼脂溶液取出,待其自然冷却至50°C左右。
7. 倒平板:将冷却至50°C左右的琼脂溶液倒入平板中,用平板摇床或手工摇匀,使其均匀分布。
8. 凝固:待琼脂凝固后,即可用于实验。
注意:在整个配制过程中,确保所有工具和容器都经过灭菌处理,以防止污染。