电镜制样技术是电子显微镜观察样品前的重要步骤,其目的是为了使样品达到电镜观察的要求。以下是一些常见的电镜制样技术:
1. 超薄切片技术:
硬组织切片:适用于骨、牙齿等硬组织。
软组织切片:适用于肌肉、神经等软组织。
2. 冷冻切片技术:
冷冻断裂技术:通过快速冷冻样品,然后断裂,观察断裂面的超微结构。
冷冻蚀刻技术:在冷冻断裂的基础上,通过蚀刻去除表面层,以暴露内部结构。
3. 负染色技术:
使用重金属盐如磷钨酸、醋酸铀等,使样品负染色,便于在电镜下观察。
4. 免疫电镜技术:
利用抗体与抗原特异性结合的特性,检测样品中的特定蛋白质。
5. 透射电镜样品制备:
样品固定:使用戊二醛、四氧化锇等固定剂。
样品脱水:通过酒精或丙酮等溶剂逐步脱水。
样品包埋:将脱水后的样品包埋在环氧树脂中。
样品切片:在超薄切片机上制备超薄切片。
样品染色:使用重金属盐进行染色。
6. 扫描电镜样品制备:
样品固定:使用戊二醛、四氧化锇等固定剂。
样品脱水:通过酒精或丙酮等溶剂逐步脱水。
样品干燥:使用临界点干燥或冷冻干燥。
样品喷金:在样品表面喷上一层金膜,以增强导电性。
7. 高分辨电镜样品制备:
需要特殊的样品制备技术,如冷冻高分辨电镜技术。
这些技术各有特点,适用于不同的样品和观察需求。在实际应用中,需要根据具体情况进行选择和调整。